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伯乐Trans-Blot SD 1703940怎么转印
2023-12-18 15:48:34 作者: 高思维医疗 1144

一、伯乐Trans-Blot SD型半干转印系统的转印操作步骤如下:

1、根据凝胶平衡、三明治装置、电泳过程等所需要的缓冲液用量准备足够的缓冲液。

2、使用去离子水浸润凝胶,并在转印缓冲液中平衡15min。所用凝胶须在缓冲液中平衡,除去电泳过程中所带的盐分。在转印过程中,这些盐会引起转印缓冲液导电性升高,产生大量的焦耳热。

3、相对于每一张凝胶,需要按尺寸裁减出一张印记膜、两到六张滤纸。

4、在电转印缓冲液中润湿滤纸。

5、将印记膜放入电转印缓冲液中平衡。组装三明治结构前,膜必须全部浸润。硝酸纤维素膜可直接在转印缓冲液中平衡;首先PVDF膜需要100%甲醇浸润后,再在缓冲液中平衡。

6、小心打开安全盖,取下阴极装置。

7、将预先润湿的超厚滤纸平房在阳极板上,用滚筒驱赶气泡。如果使用厚或薄的滤纸,则叠加2~3张湿润的滤纸,并驱赶气泡。

8、将预先浸润的印记膜小心放在滤纸上,驱赶气泡。

9、将平衡后的凝胶放在印记膜上,将凝胶放在印记膜中央,如果凝胶超出印记膜外有所偏离,将不能达到全部转印,要裁剪同样尺寸的印记膜和滤纸。放置后尽量不要移动转印膜,以防止产生玷污印记和10、人为印迹。用滚筒驱赶气泡,使凝胶和印记膜完全接触。

11、在凝胶上方放入另外一块润湿后的超厚滤纸;如果使用厚或薄的滤纸,则叠放2~3张润湿后的滤纸,并驱赶气泡。擦干凝胶/印迹膜三明治结构外过量的缓冲液,以防止电流泄漏。

小心盖上阴极盖。

12、加盖装置的安全盖。

13、接通电源,设置电泳仪参数,开始转印过程。

14、转印结束后关闭电源,取下转印夹,拆卸凝胶三明治装配,用ddH2O清洗印记膜,确保膜上无剩余凝胶和样品,之后进行样品检测、成像。


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二、伯乐Trans-Blot SD的特点包括:

1、能在15~60分钟内完成快速、高效的转印。

2、需要的缓冲液量少,且缓冲液只限于凝胶三明治的滤纸上。

3、能转移多块凝胶,凝胶可并排或叠放。

4、简单的闭锁设计,方便快速装配。

5、板式电极含有涂有铂金的钛正极和不锈钢负极,能提供均匀可靠的转印,且经久耐用。

6、阳极平台装有4个弹簧,能使平台容纳不同厚度的叠置凝胶,并在转印过程中对转印三明治产生均一压力。

7、独特的琼脂糖凝胶支持框能从琼脂糖凝胶上转印DNA和RNA。

8、无需其他半干转印仪用于防止电极短路的塑料板。

9、提起安全盖时,电流被切断,能防止电击,保护使用者。

10、除了Western转印杂交,Trans-Blot SD转印槽也能运用独特的琼脂糖凝胶半干转印支持框架转印DNA和RNA。框架能保护易碎的琼脂糖凝胶免受电极压力。

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