1、仪器基本性能分析

1.1 仪器结构

常用紫外可见分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器、信号处理系统等部分组成，光源的功能是提供足够强度且稳定的连续光谱，紫外光区常用的有氢灯和氘灯，可见光区常用钨灯、卤钨灯；单色器是用来将光源发出的复合光分解并从中分出所需高纯度单色光的装置，主要组成为入射狭缝、色散元件、透镜等；吸收池分为玻璃和石英两种材质，可见光区两者均可使用，紫外光区必须用石英吸收池；检测器又称为光电转换器，可用光电转换元件检测透过光的强度，将光信号转变成电信号，常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管以及光二极管阵列检测器等。

紫外可见光光度计工作过程如下：光源通过狭缝投向单色器，光线在这里被分解为一个连续的色带，并经由狭缝过滤成具有一定宽度的单色光；光线再通过吸收池、检测器，使光信号变成电信号，经放大处理Z后通过显示器显示。

1.2 仪器主要特点

紫外可见分光光度计种类繁多，按照光路系统可分为单光束和双光束分光光度计；按照测量方式可分为单波长和双波长分光光度计；按照绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。

仪器使用前，操作者应先了解仪器的结构和工作原理，以及各个选项的功能。未接通电源之前，应对仪器的安全性能进行检查，保证电源接线牢固，通电良好，各个调节旋钮起始位置正确。影响稳定性的因素主要有仪器自身、电源及环境条件等，结合 JJG 178–2007 《紫外、可见、近红外分光光度计　检定规程》及日常操作经验，一般要求安装稳压电源以确保仪器的电压为 (220±22) V，电源频率为(50±1) Hz。

仪器所处环境应干净、防尘，周围无强电磁场、强震动干扰，不受强光直射，保持温度在 10~35℃之间，相对湿度不大于 85%。在仪器的使用过程中，若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，待灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点，再进行测量。

2、仪器故障处理及期间核查

外可见分光光度计多数故障是光路原因。遇到仪器故障时，可以先检查以下几项做初步排查：

（1）钨灯不亮。一般原因为灯丝烧断或者没有灯电压，可用万用表的电阻档和电压档对钨灯灯丝是否通断以及灯电压的有无 ( 灯电压一般在 10 V左右 ) 进行检测。

（2）氘灯不亮。采用全波长扫描，若此时紫外区谱图轮廓上有许多毛刺，则可判断灯寿命到期；若新换氘灯依然不亮，则可能是电路问题，此时可以用万用表检测氘灯的灯丝电压，正常情况下，起辉前灯丝电压为 10 V，阳极电压为 350 V，起辉后灯丝电压为 7 V，阳极电压为 90 V。也可以通过氘灯起辉后的辉光颜色进行判断。随着灯使用时间的增加，辉光的颜色会由蓝 – 粉 – 白逐渐变化，同时灯周围臭氧的味道也会逐渐减弱，一般辉光到达粉色时灯基本可以进行报废处理。

（3）全波段基线噪声大。全波段基线噪声大的主要原因是光源镜劣化，这是由于光源镜距离光源灯Z近，长时间受到灯照射破坏了镜子表面镀膜的光洁度，减弱了光源镜的反射率，从而导致仪器信噪比的降低。可用目视法检查光源镜表面，优良的光源镜面呈黑色，劣化后的光源镜呈白色，并留有光灼烧的痕迹。此外，还应检查石英窗是否被污染，若有污染，则可用乙醇擦拭清除。

（4）部分区域基线噪声大。可见区噪声大多为钨灯老化所致，可采用钨灯能量检查进行判断；紫外区噪声大多为氘灯老化所致，可参照全波长扫描或氘灯起辉后的辉光颜色进行判断；也可能是某些常年暴露在空气中的光学器件的问题，例如透镜、石英窗等，可采用乙醇擦拭。

（5）吸光值结果出现负值。吸光值结果出现负值，一般是没有做参比溶液空白，样品的吸光值小于空白参比溶液，可以尝试将参比溶液与样品液调换位置，若此时吸光度值不小于 0，则确信如此，此时将参比溶液和样品溶液复位，重新做空白记忆或用参比溶液配置样品溶液即可。

（6）没有检测信号输出。没有检测信号输出，多数情况是由于没有光束照射到样品室内造成的，可将波长设定为 530 nm，狭缝调至Z宽档位，在黑暗环境下，将一张白纸放置于样品室光出口处，观察白纸上有无光斑影像，若无光斑，则需要进一步检查光源镜是否转到位，双光束仪器的切光电机是否有转动 ( 耳朵可以听见电机转动的声音 )。

（7）仪器不能调“0”或“100%”。仪器不能调“0”或“100%”，应检查光门是否完全关闭；检查仪器是否长期不用，若严重受潮，应及时更换或烘烤干燥剂；检查光能量是否足够；查看比色皿架是否安装到位，且是否稳定；查看比色皿在比色皿架中放置的位置是否一致，表面是否洁净。

（8）测量数据重现性不佳。若比色皿支架为推拉式，考虑是否由于支架受溶液腐蚀导致底部滑轨和轴承生锈，从而使支架定位产生偏移，使得测试光束每次照射到比色皿的位置不同，影响测定结果的重现性；若排除仪器自身原因后，Z大的可能是样品溶液不均匀所致，可更换一种稳定的试验样品进行验证。

3、仪器期间核查及维护

在两次检定之间进行的核查。在两次检定之间，分析仪器工作者要根据使用情况对仪器进行至少一次的期间核查，目的是了解仪器的运行状态，排除仪器不稳定性对检验结果的影响。仪器操作过程主要受光源、波长、吸收池以及相应方法的影响，因此期间核查可以从以波长准确度、测量重复性、杂散光、光源、单色器、检测器、吸收池、吸收曲线、溶剂等方面着手 ( 以德国耶拿分析仪器股份公司的紫外可见分光光度计 Specord 210 Plus 为例)。