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TBS(Tris缓冲盐水)、 TBST(含Tween 20的Tris缓冲盐水)、 PBS(磷酸盐缓冲液) 和 PBST(含Tween 20的磷酸盐缓冲液) 是生物化学实验中常用的缓冲溶液,它们各自有不同的用途、共同点和区别。
一、TBS(Tris缓冲盐水)
1、定义:TBS,即Tris缓冲盐水,是Tris-HCl缓冲盐溶液的简称。组成:TBS主要由三羟甲基氨基甲烷(Tris)和氯化钠(NaCl)组成。其中,Tris提供缓冲能力,能够维持溶液在一定pH范围内的稳定性;NaCl则有助于调节溶液的渗透压,使其接近生理条件。
2、主要用途:
TBS:通常用于模拟生理条件,pH值呈弱碱性,广泛用于免疫测定、免疫组织化学染色、原位杂交、Western blot等实验中作为洗涤缓冲液或抗体稀释剂。
3、每1000ml配方:
TBS (Tris-Buffered Saline) 配方:6.05克 Tris base 85.0克 氯化钠 (NaCl) 用HCl调整pH值至7.4-7.6
二、TBST(含Tween 20的Tris缓冲盐水)
TBST(含Tween 20的Tris缓冲盐水)是一种在生物化学实验中常用的缓冲溶液,它主要用于增强洗涤效果,特别是在Western Blotting等实验中。
1、定义:TBST是在TBS(Tris缓冲盐水)的基础上添加了Tween 20这一成分而得到的缓冲溶液。组成:TBST主要包含Tris(三羟甲基氨基甲烷)、NaCl(氯化钠)和Tween 20。其中,Tris和NaCl构成基本的缓冲盐溶液,而Tween 20则是一种非离子型表面活性剂,能够增强洗涤效果。
2、主要用途:
TBST:在TBS的基础上添加了Tween 20,增强了洗涤能力,常用于Western blot实验中洗涤膜以去除非特异性结合的抗体。
3、每1000ml配方:
TBST (Tris-Buffered Saline with Tween-20) 配方:与TBS相同,加上: 1ml
三、PBS(磷酸盐缓冲液)
PBS(Phosphate Buffered Saline),即磷酸盐缓冲液,是生物学和医学研究中广泛使用的一种缓冲溶液。
1、定义:PBS是一种以磷酸盐为主要成分的缓冲溶液,用于维持生物样品或实验体系中的pH稳定和渗透压平衡。组成:PBS的主要成分包括磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)、氯化钠(NaCl)以及有时还包括氯化钾(KCl)。这些成分的比例可以根据具体实验需求进行调整,以达到所需的pH值和渗透压。
2、主要用途:
pH值相对稳定,常用于细胞实验、免疫染色等作为缓冲液或者洗涤液。
3、每1000ml配方:
配方:1.42克 磷酸二氢钠 (NaH2PO4) 8.77克 磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 90.0克 氯化钠 (NaCl) 用NaOH调整pH值至7.2-7.4。
四、PBST(含Tween 20的磷酸盐缓冲液)
PBST(含Tween 20的磷酸盐缓冲液)是一种在生物学实验和研究中广泛使用的混合溶液,主要由磷酸盐缓冲液(PBS)和Tween-20组成。
1、定义:PBST是在PBS的基础上添加了Tween-20这一非离子型去污剂而得到的混合溶液。组成:PBST的主要成分包括磷酸盐缓冲液(PBS)和Tween-20。PBS通常由磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠以及有时还包括氯化钾等盐类组成,用于维持溶液的pH稳定和渗透压平衡。Tween-20则是一种表面活性剂,具有乳化、润湿、分散和增溶等多种功能。
2、主要用途:
所有这些缓冲液都用于生物化学实验中的洗涤步骤,目的是去除未结合的试剂,降低背景噪声,提高实验结果的信噪比。它们都含有维持溶液等渗的氯化钠(NaCl)成分。
3、每1000ml配方:
PBST (Phosphate-Buffered Saline with Tween-20) 配方:与PBS相同,加上: 1ml Tween-20
五、共同点:
所有这些缓冲液都用于生物化学实验中的洗涤步骤,目的是去除未结合的试剂,降低背景噪声,提高实验结果的信噪比。它们都含有维持溶液等渗的氯化钠(NaCl)成分。
六、区别:
成分上:TBS和TBST基于Tris,而PBS和PBST基于磷酸盐。TBST和PBST添加了Tween 20以增强洗涤效果,但TBS和PBS没有。pH稳定性:PBS的pH值相对稳定,而TBS的pH值随温度变化较大。