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分子生物学实验中离心机的选择
2024-08-26 13:23:52 作者: 高思维医疗 1144

离心机是一种常用的实验室设备,用于分离混合物中的固体颗粒或液体成分。离心机广泛应用于医院实验室、科研机构实验室、食品药品检测实验室、食品卫生实验室等各种实验室。

离心是集中作用于所有不同密度粒子的自然力以加速自然分离过程的过程。它是通过试管中的密度来分离颗粒的。可以使用过滤或沉降方法进行离心。离心分离的核心是通过沉降分离。较密集的颗粒沉入容器底部,而较轻的颗粒保持悬浮。


一、离心将置换密度甚至略有不同的颗粒,并受以下四个因素的影响:样品和溶液的密度,温度和粘度,粒子位移的距离,旋转速度。

1、台式离心机:台式离心机通常较小型,适用于小样本处理和常规实验室工作。

2、大容量离心机:大容量离心机具有较大的离心容量,适用于处理大样本量或高速离心分离。

3、微量离心机:微量离心机适用于处理微量样品,通常具有较小的离心容量和较高的转速。超速离心机:超速离心机可以实现更高的离心速度和更大的离心力,适用于处理特殊需求的样品。

4、低温离心机:低温离心机具有冷却系统,可以在低温条件下进行离心分离,适用于对样品温度的应用。

5、透明离心机:透明离心机的离心腔体采用透明材料制成,可以实时观察样品的离心过程。


二、离心机转速:

1、离心机按转速可分为低速离心机(≤6000r/min)、高速离心机(≤25000r/min)、超高速离心机(≥30000r/min)。

2、当物料的粒径在1微米到50微米之间时,可以用低速离心机进行分离。

3、转速约4000转至7000转,相对离心力约2000克至9420克。一般采用台式低速离心机或落地式低速大容量离心机。分离直径约0.1~1微米的动植物组织中的病毒等物质时,推荐使用转速为10000~20000转,离心力约10000转的高速冷冻离心机。

4、分离直径约0.002~0.1微米的各种蛋白质、DNA、RNA等成分时,需要超速离心机,转速在40000转/分以上,离心力要达到100000g~400000g。


三、提篮式 vs 固定倾角离心机

在提篮式转子中,转子桶水平向外摆。这样可以对样品进行水平离心和分离。顾名思义,固定倾角转子的角度是固定的(30°-45°),因此分离以一定角度进行。在提篮式转子中,颗粒状材料会在管底形成颗粒,而在固定角转子中,材料会在管侧面形成颗粒。这样一来,在不干扰颗粒状材料的情况下转移上清液会变得很困难。但是,固定角转子可以达到更高的速度,因此适用于需要Z高速度的应用。


四、固定倾角离心机的应用:

分离生物大分子(如RNA、DNA 和蛋白质)所需的重力比沉淀动物和植物细胞所需的重力更大。例如,分离细菌核糖体需要以100,000 x g 的速度离心。因此,固定角转子通常是有效沉淀这些大分子所必需的。此外,由于沉淀所需的时间减少,任何需要快速沉淀样品的应用都Z适合使用固定角转子。


五、提篮式离心机的应用:

由于容器会水平旋转,因此沉淀物会沉积在试管或容器的底部。因此,对于不需要固定角转子的更高G力但需要精确分离的任何应用,如相分离应用(例如苯酚-氯仿萃取),这种转子是理想的选择,因为在提篮式转子中离心后,相间屏障更稳定。另一个重要应用是创建梯度,这需要垂直带化才能有效分离颗粒。活细胞的造粒需要低速才能保持细胞活力,这是提篮式转子的另一个重要应用。提篮式转子有多种形式,适用于各种尺寸和形状的试管,从0.2ml PCR管到多升桶,以及微孔板专用转子,而固定角转子形式则没有这种转子。


六关于平衡离心力:

使用离心机时,有必要平衡样品。通过以下方式平衡离心机:

1、确保所有试管均匀填充密度相似的液体。

2、将管彼此相对放置在机器内以保持重力在中心当测试奇数个试管时,可能无法建立平衡。在这些情况下,将另一个试管装满水并根据密度和质量进行平衡。

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