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伯乐Gene Pulser Xcell电穿孔系统快速指南
2024-09-14 10:39:21 作者: 高思维医疗 1040

一、手动操作

1、主屏幕:

(1)按 Enter 键选择指数衰减;

(2)按2,然后按Enter 键选择指数衰减,但指定时间常数;

(3)按3,然后按Enter 选择方波。

2、使用向上和向下箭头键滚动浏览屏幕上的参数值。当参数值高亮显示时,使用键盘输入一个值,然后按 Enter 。

3、输入设定的参数值后,Gene Pulser Xcell 上的脉冲按钮将处于活动状态。屏幕右下角“P”闪烁状态。

4、按脉冲按钮对样品进行电穿孔。

5、按返回键返回到“协议详细信息”屏幕并发送另一个脉冲。


二、使用预设Protocol界面操作

1、在主屏幕上,按 4,然后按 Enter 键以显示预设协议屏幕。

2、按 1–3 在细菌、真菌或哺乳动物细胞之间进行选择;按 Enter 键选择生物体类型并显示生物体列表。 

3、按协议旁边的数字将其突出显示。按 Enter 键选择并显示“协议详细信息”屏幕。

4、按脉冲按钮对样品进行电穿孔。

5、按返回键返回到“协议详细信息”屏幕并发送另一个脉冲。


三、使用用户协议

1、在主屏幕上,按 5,然后按 Enter 键打开“用户协议”菜单并显示第一个“用户目录”屏幕。

2、按 1–12 突出显示所需的名称;按 Enter 键选择该名称以显示第一个用户协议屏幕。

3、按 1–12 突出显示所需的协议名称;按 Enter 键选择该协议并显示“协议详细信息”屏幕。Gene Pulser Xcell 上的脉冲按钮现已激活。

4、按脉冲按钮对样品进行电穿孔。

5、按返回键返回到“协议详细信息”屏幕并发送另一个脉冲。


四、Gene Pulser Xcell 的预设协议

1、预设协议的特点

(1)优化程序:Gene Pulser Xcell 系统为各种细胞类型预设了经过验证的转化程序,这些程序基于Bio-Rad在电转化技术上的多年经验积累,能够确保高效的转化效率和细胞存活率。

(2)快速选择:用户可以通过简单的操作快速选择预设程序,无需手动设置复杂的参数,从而节省了时间并降低了操作难度。

(3)可调整性:尽管系统提供了预设程序,但用户仍然可以根据需要对手工编程的所有参数进行修改或直接编辑,以适应不同的实验条件或细胞类型。


2、预设协议的内容

(1)电场强度(kV/cm):描述电击杯外界电场环境的一个参数,直接影响电穿孔的效果。

(2)时间常数(ms):在指数波模式下,用于衡量脉冲时间的一个参数,与电阻和电容的大小有关。

(3)脉冲时间:细胞被放电的时间,对于方波模式来说是一个重要的参数。

(4)脉冲次数:在方波模式下,脉冲可以被反复释放的次数。

(5)脉冲间隔时间:两个脉冲之间的间隔时间,也是方波模式下的一个重要参数。


3、预设协议的使用

(1)选择预设程序:在实验开始前,用户可以根据实验目的和细胞类型选择相应的预设程序。

(2)验证和调整:虽然预设程序已经过优化,但用户仍然可以在实验过程中根据需要进行验证和调整,以确保Z佳的实验效果。

(3)执行实验:按照预设程序设置的参数执行实验,并记录实验数据以供后续分析。

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