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【干货满满】超微量分光光度计性能检查
2024-10-23 09:29:35 作者: 高思维医疗 1201

超微量分光光度计作为常用的核酸、蛋白等生物大分子的定量和表征工具,广泛应用于生命科学和生物制药等领域,用户仅需微量样品即可快速获得浓度及吸光度结果。然而在日常使用中,一些用户会对测量结果有疑虑,尤其是当测量结果与预估的结果出现较大差异,或与使用其他方法的定量结果有差异时,用户往往会怀疑设备出现问题或故障。其性能检查是确保仪器准确性和可靠性的重要步骤,以下是对超微量分光光度计性能检查的一些建议:


一、检查前的准备

1、确保仪器处于稳定状态:检查仪器是否放置平稳,避免震动和干扰。

2、检查光源:确保光源(如氙气闪光灯)正常工作,无闪烁或亮度不均现象。

3、检查检测器:确保检测器灵敏度高,能够准确检测微弱光信号。

4、校准仪器:使用标准溶液(如重铬酸钾标准溶液)进行校准,确保仪器测量结果的准确性。


二、性能检查

1、标准品测量

常用的标准品可使用BSA或核酸标准品,可从各试剂厂家购买,或使用如BCA定量试剂盒,QUBIT核酸定量试剂盒中的标准品。请注意标准品一定要在效期之内,且保存得当(通常低温)。也可以使用设备厂家提供的小分子化合物标准品,如Implen提供的PHP标准品。标准品是有等级区分的,通常附带有检定证书的标准品,标称浓度会更准确。    特别指出的是,使用未知浓度的样品,来评估不同设备的测量结果,并以其中一台作为基准,判定另外一台的准确性,是完全错误的。

2、重复性测量

在缺乏标准品,或标准品由于保存不当状态已存疑时,可使用未知浓度样品做重复性测试。这可以判断设备的稳定性,以排除一些潜在问题,如样品台损坏、样品的非均质,成分干扰等。虽然不能确定准确性误差,但重复性很好的设备,很大几率是没有大问题的。当然,这需要结合您的允差要求,综合考量。

3、梯度稀释测量

使用已知浓度或未知浓度的样品,均可进行梯度稀释测量,以验证设备的线性稳定性。使用设备的标准曲线功能可便捷地完成此项测试,并给出线性回归。当梯度稀释的R2趋近于1,设备的线性完全可满足广泛的动态范围内的测量要求,同时也可反映设备的良好状态。需要注意的是,梯度稀释时一定要选择定期校准过的,准确性好的移液器,且正确操作。

4、基线稳定性测量

 光源和CCD检测器,作为设备的核心组件,其稳定性对于设备而言是非常重要的,而基线测量可以很好地反映这些部件的状态。使用水(或空气)作为空白,并且用水(或空气)作为样品,做多次重复测量,如果吸光值的漂移很小,通常可反映设备的光学系统组件状态正常。


三、性能检查后的处理

1、记录检查结果:详细记录各项性能检查的结果和数据,以便后续分析和比较。

2、分析检查结果:对检查结果进行分析和评估,判断仪器是否满足使用要求。

3、调整或校准仪器:根据检查结果,对仪器进行调整或校准,确保仪器处于Z佳工作状态。

4、制定维护计划:根据仪器的使用情况和性能检查结果,制定定期维护和保养计划,延长仪器的使用寿命和保持其准确性。


超微量分光光度计的性能检查是确保其准确性和可靠性的重要步骤。通过全面的性能检查,可以及时发现并解决问题,确保仪器在科研和实验中的准确性和可靠性。

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