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PCR 仪全称为聚合酶链式反应仪(Polymerase Chain Reaction Instrument),是一种用于体外扩增特定 DNA 片段的仪器设备,在分子生物学等众多领域有着极为重要的应用,以下为你详细介绍它的相关情况:
一、工作原理
它基于聚合酶链式反应的原理来运行。PCR 反应主要包括高温变性、低温退火、适温延伸这三个基本步骤的循环过程。在高温(通常 90℃-95℃)下,双链 DNA 解旋变为单链;接着在相对低温(依据引物的不同而有差异,一般 50℃-65℃左右)条件下,引物与单链 DNA 模板特异性结合(退火);然后在合适的温度(70℃-75℃左右)下,DNA 聚合酶以引物为起始点,按照模板链的碱基序列合成新的互补链,经过多次这样的循环,目的 DNA 片段就可以得到大量复制、扩增。
二、基本构造
1、温度控制系统:这是 PCR 仪的关键部分,能精准且快速地按照设定要求改变反应体系的温度,实现变性、退火、延伸等不同温度阶段的切换,保障 PCR 反应顺利进行。其控温方式包括加热模块(如电阻丝、半导体等)以及制冷组件(像压缩机、半导体制冷片等)。
2、反应模块:是放置 PCR 反应管或反应板的地方,有不同的规格和形式,常见的有 96 孔、384 孔等,以适应不同通量的实验需求。
3、控制系统和显示界面:使用者可以通过控制系统来设定反应的温度、时间、循环次数等各项参数,并且能在显示界面查看反应的实时状态以及相关参数信息等。
三、主要作用
1、科研方面:帮助科研人员从微量的 DNA 样本中扩增出足够量的目的 DNA 片段,便于后续进行基因克隆、测序、基因表达分析、基因多态性研究等诸多实验操作,是探索基因奥秘、开展遗传学、分子生物学等众多学科研究必不可少的工具。
2、医学诊断领域:比如在检测病原体(像新冠病毒、乙肝病毒等)时,即使患者体内病原体含量很低,也可通过 PCR 仪扩增其核酸片段,进而实现精准的诊断;还能用于一些遗传性疾病的基因检测、肿瘤相关基因检测等,辅助医生制定治疗方案。
3、法医学应用:可对犯罪现场遗留的微量生物样本(如毛发、血迹等)中的 DNA 进行扩增,为案件的侦破、身份鉴定等4、提供关键的遗传学证据。
食品检测方面:检测食品中是否存在有害微生物、转基因成分等,保障食品安全。
总之,PCR 仪凭借其能高效扩增 DNA 片段的功能,在众多领域都发挥着极为关键的作用,推动了相关学科和行业的不断发展。
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