使用 PCR 仪时，有以下诸多注意事项：

一、仪器操作前

1、环境要求：PCR 仪应放置在平稳、干燥、通风良好且远离大型电机等强电磁干扰源的环境中，环境温度一般建议维持在 10℃-30℃，相对湿度在 20%-80%，以保障仪器能正常稳定运行，避免因环境因素导致仪器性能受损或出现故障。

2、电源检查：确认所接入的电源电压与 PCR 仪的额定电压相符，并且要有良好的接地，防止出现漏电等电气安全问题，保障仪器和操作人员的安全。

3、预热准备：部分 PCR 仪在使用前需要进行预热，按照仪器说明书规定的时间和要求进行预热操作，使仪器达到合适的工作状态，有助于后续实验结果的准确性。

二、样本准备及加样环节

1、样本处理规范：样本的采集、提取、保存等过程要严格遵循相应的标准操作规程，避免样本受到污染，比如在核酸提取时要保证操作环境的洁净、使用无核酸酶的耗材等，防止外源核酸混入影响后续 PCR 扩增结果。

2、加样准确性：准确吸取反应体系各成分，如模板 DNA、引物、dNTP、缓冲液、Taq 酶等，使用经过校准的移液器，并且要注意避免产生气泡，确保各成分加入量的精准，不然会影响扩增反应的效率和特异性。

3、防止交叉污染：在加样过程中，要及时更换移液器枪头，不同样本之间不能共用枪头，操作区域要保持干净整洁，可使用一次性的防护垫等物品，防止样本之间出现交叉污染，导致实验结果出现偏差。

三、仪器运行过程中

1、参数设置正确：依据实验需求，准确设置 PCR 反应的各参数，包括变性温度、退火温度、延伸温度、各阶段的时间以及循环次数等，这些参数的准确与否直接关系到能否成功扩增出目标片段以及扩增的特异性和产量等，设置后要仔细核对。

2、运行状态监测：在仪器运行期间，要留意观察仪器的运行状态指示灯等，确保仪器正常运转，若出现异常报警声或者显示故障代码等情况，要及时按照说明书提示排查问题，必要时停止运行并联系专业维修人员。

四、仪器使用后

1、关机与清洁：实验结束后，按照仪器的关机程序正常关闭 PCR 仪，不可直接切断电源。定期对仪器的外部表面进行清洁，使用柔软干净的湿布擦拭，去除灰尘等杂物，但要避免液体进入仪器内部，对于内部的清洁，可联系专业的维修保养人员按照规范来操作。

2、数据记录与保存：及时记录本次 PCR 实验所设置的参数以及仪器运行的相关数据等，便于后续分析实验结果以及进行实验的重复性验证等，并且要妥善保存好这些数据资料，可采用电子文档等合适的存储方式。

3、耗材清理：将使用过的 PCR 反应管、移液器枪头、一次性手套等耗材按照生物安全相关规定进行妥善处理，防止对环境造成污染以及避免生物危害。